化膿性心包炎動物模型

化膿性心包炎動物模型

(1)復(fù)制方法  體重為2.0～2.5kg新西蘭兔，將動物仰臥位固定后，用1％鹽酸普魯卡因局部浸潤麻醉，無菌手術(shù)作胸正中切口，橫斷肋骨，牽拉結(jié)扎線，顯露心包裸區(qū)。用7號針在劍突下經(jīng)皮向心尖方向刺入心包腔，注入1000000000個/ml青霉素敏感金葡菌溶液或生理鹽水1ml/kg。縫合切口。全部動物于術(shù)后21d麻醉放血處死。取心尖部的右室全層心肌3塊，肝、肺組織各1塊，心包1塊作病理學(xué)檢查。心包化膿粘連增厚程度的制定標(biāo)準(zhǔn)及量化。按心表面分為四區(qū)：心尖部、左心部(左心房及左心室)，右心部及大血管根部，每區(qū)按下列標(biāo)準(zhǔn)判定心包各區(qū)增厚程度(等級數(shù)為其量化數(shù))。正常心包，心包薄而透明，心包與心肌無粘連，透過心包可清晰見到心肌及表面的血管和血管網(wǎng)；：心包與心肌有散在粘連，粘連部有少許膿性物質(zhì)，透過心包見不到血管網(wǎng)，但仍可見心肌；：心包明顯增厚，心包內(nèi)有大量黏稠膿液及膿苔，已不能透過心包看到心肌及表面的血管，心包表面有大量高度擴張的血管。光鏡觀察：心肌標(biāo)本用甲醛一蔗糖溶液固定，然后HE染色觀察心包及心肌病理改變。肝臟、肺組織用甲醛固定。觀察肝、肺病理改變。 ATP酶染色(鈣鈷法)，觀察心肌病理改變，分級參照Nilest法等級數(shù)量為量化數(shù)。正常心肌，心肌纖維排列整齊，橫紋清晰，ATP酶活性強，細(xì)胞染色較深而均勻。：接近0級，心肌纖維排列尚整齊，橫紋清晰，ATP酶活性較強，細(xì)胞染色較深而均勻。：心肌少許受損，心肌纖維排列紊亂，橫紋不清，ATP酶活性下降，細(xì)胞染色淺。心肌受損，心肌纖維排列紊亂，橫紋不清，ATP酶活性顯著下降，細(xì)胞染色淺淡，甚至不著色。電鏡觀察：心肌標(biāo)本用戊二醛固定，環(huán)氧樹脂618包埋，超薄切片(厚度60nm)，重金屬鹽鈾鉛雙染，電鏡下觀察攝片。觀察心肌肌原纖維，細(xì)胞、潤盤、細(xì)胞核核膜、肌漿網(wǎng)、線粒體、糖原等變化。

(2)模型特點  ①與人類疾病特征相似。②病變有發(fā)展過程，即明顯分期。③形成率高，死亡率低。④造模方法簡便易行。⑤動物來源多、價格低。

(3)比較醫(yī)學(xué)  本實驗?zāi)Ｐ筒捎貌黄茐男啬で伙@露心包，直視下向心包腔內(nèi)注入青霉素敏感金葡菌溶液，建立化膿性心包炎模型。術(shù)后21d肉眼觀察模型動物心包明顯增厚，并有散在出血點；心包、心壁之間有大量黏稠膿液、膿苔。光鏡下觀察顯示：心包有肉芽組織生長，心肌萎縮，有炎癥細(xì)胞浸潤、肌絲斷裂、肝細(xì)胞顆粒樣變性、肝淤血。肺淤血伴胸腔積液。心肌ATP酶染色，可見不同程度ATP酶活性降低，染色不均勻，色淡或著色。肌纖維排列紊亂等變化。電鏡觀察，肌絲區(qū)肌漿丟失，糖原減少，肌絲斷裂，凝縮較嚴(yán)重，部分肌細(xì)胞強直收縮。部分細(xì)胞核腫脹。核質(zhì)稀淡，心肌細(xì)胞間潤盤離散，斷裂。線粒體出現(xiàn)不同程度腫脹，基質(zhì)丟失，空白區(qū)出現(xiàn)，有時有破裂。肌細(xì)胞間有淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤。本模型可模擬化膿性心包炎的病理發(fā)展過程，與臨床上化膿性心包炎的病理生理、病理變化十分相似。