上海穩(wěn)轉株構建

上海穩(wěn)轉株構建

一、詳細介紹
        上海穩(wěn)轉株構建常規(guī)轉染技術可分為兩大類，一類是是瞬時轉染，一類是穩(wěn)定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中、雖然可以達到高水平的表達，但通常只持續(xù)數(shù)天，在轉染后24-72小時內(nèi)（依賴各種不同的構建手段）分析結果，常常用到一些報告基因系統(tǒng)如熒光蛋白，β-半乳糖苷酶等來幫助檢測。穩(wěn)定轉染則是外源質(zhì)粒DNA整合到宿主細胞染色體上，使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白，需要在瞬時轉染基礎上對靶細胞進行篩選或者應用高轉染效率的病毒。建立穩(wěn)定轉染細胞系時，需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物對靶細胞進行篩選，常見的抗性標志物有潮霉素（hygromycin）、嘌呤霉素（puromycin）和新霉素（neomycin）。篩選得到的細胞能夠穩(wěn)定表達目的蛋白，可以用于目的蛋白的擴增和富集，或者得到穩(wěn)定沉默特定基因的細胞株。

二、服務項目及周期