Timm染色實(shí)驗(yàn)

 Timm染色實(shí)驗(yàn)
用于鋅離子組織化學(xué)定位的方法銀染法(neo-Timm）硫化銀法,neo-Timm法是對(duì)離子狀態(tài)、 疏松結(jié)合或螯合狀態(tài)下的鋅離子染色,便于光、電鏡的觀察.

Timm染色方法是一種能夠顯示組織細(xì)胞內(nèi)重金屬分布的常用方法。苔蘚纖維末端是腦內(nèi)含鋅量高的區(qū)域，因此可以用此方法顯示苔蘚纖維末梢分布的情況。

Timm組織化學(xué)染色（Timm染色實(shí)驗(yàn)）：
1.  切片貼附于多聚賴氨酸處理過的載玻片上。（-20°保存）
2.  做的時(shí)候拿出來(lái)晾干（10分鐘）。
3.  把Timm顯影劑倒入修復(fù)盒中，放在在26℃的水浴箱或恒溫?fù)u床里染色90-150min，染色在避光的條件下進(jìn)行。
4.  染色后，切片用蒸餾水沖洗幾遍，可以尼式染色復(fù)染，也可不復(fù)染。
5.  晾干，中性樹脂封膠片。

Timm液的配置：
A:防護(hù)膠：30g阿拉伯膠攪拌溶解于60ml去離子水中（充分?jǐn)噭蛉芙猓ｌo置兩天，如果有雜質(zhì)可用雙層紗布濾過。膠不急用的話冷凍保存在塑料瓶里可以保存至少6個(gè)月。

B：枸櫞酸緩沖液：2.55枸櫞酸•H2O加2.35枸櫞酸鈉•2H2O，加去離子水至10ml。
C:還原劑：0.85g對(duì)苯二酚（氫醌）溶于15ml的去離子水。
D:銀離子供應(yīng)：0.11g乳酸銀（硝酸銀）加入15ml的去離子水。乳酸銀對(duì)光高敏感，因此此溶液應(yīng)當(dāng)避光。
A B C溶液小心混合，D溶液在用之前立即加入。一次做八到十張片子比較合適。

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圖片，結(jié)果及分析

實(shí)驗(yàn)周期：3-4周