產品中心
Product Center心血管相關原代分離(原代培養心肌細胞)作為一種主要的體外研究模型,被廣泛應用于心血管研究之中。常用于電生理、心肌損傷修復、心肌缺血再灌注損傷機制和藥物保護心肌的機制研究。我們經過長期嘗試,摸索出了一些行之有效的方法,能夠獲得純度高、活性好的原代新生大鼠、小鼠心肌細胞。
品牌 | 其他品牌 |
---|
原代培養心肌細胞作為一種主要的體外研究模型,被廣泛應用于心血管研究之中。常用于電生理、心肌損傷修復、心肌缺血再灌注損傷機制和藥物保護心肌的機制研究。我們經過長期嘗試,摸索出了一些行之有效的方法,能夠獲得純度高、活性好的原代新生大鼠、小鼠心肌細胞。
分離方法:
新生大鼠或小鼠心肌細胞常用II型膠原酶消化法。例如,通過剪碎心臟組織后,用0.05% II型膠原酶預消化去除血細胞,再用0.1% II型膠原酶分階段消化(12分鐘+4分鐘),結合差速離心或Percoll密度梯度離心分離心肌細胞,存活率可達80%以上。成年心肌細胞則需優化酶解條件,如添加布雷他汀(Blebbistatin)以抑制收縮損傷,提高活力和電生理特性。
關鍵優化:
鼠齡選擇:新生1-3日齡乳鼠心肌細胞增殖能力較強,分離后貼壁快、存活率高;成年心肌細胞需更精細的酶解流程。
培養基與基質:MEM培養基結合層粘連蛋白基質可維持心肌細胞形態和功能。
凍存技術:優化冷凍保存液(如含DMSO和血清)可實現66%以上的細胞回收率,且功能損傷極小。