小鼠去卵巢心肌缺血再灌注模型構(gòu)建

一、模型構(gòu)建目的

該模型主要用于模擬絕經(jīng)后女性因雌激素水平下降導(dǎo)致的心血管疾病易感性，探究雌激素缺乏與心肌缺血再灌注損傷的關(guān)聯(lián)。例如，研究顯示去卵巢后的小鼠心肌損傷加重，而中藥桃紅四物湯通過激活Nrf2/HO-1通路可減輕這種損傷。

二、構(gòu)建步驟

1. 去卵巢手術(shù)

• 動物選擇：6-8周齡雌性小鼠，確保性成熟且未自然絕經(jīng)。

• 手術(shù)方法：實施雙側(cè)卵巢切除術(shù)，che底清除雌激素來源，術(shù)后需等待2-4周以模擬穩(wěn)定的絕經(jīng)狀態(tài)。

2. 心肌缺血再灌注手術(shù)

• 麻醉與準(zhǔn)備：采用腹腔注射麻醉（如戊ba比妥鈉），氣管插管連接呼吸機維持呼吸。

• 手術(shù)入路：左胸外側(cè)切口，鈍性分離肌肉至第3-4肋間隙，撐開胸腔暴露心臟。

• 缺血操作：結(jié)扎左前降支冠狀動脈（LAD）30-60分鐘，造成心肌缺血；松開結(jié)扎線恢復(fù)血流模擬再灌注（通常持續(xù)2-24小時）。

• 關(guān)胸與縫合：逐層縫合胸腔，術(shù)后撤除呼吸機并監(jiān)測自主呼吸恢復(fù)。

三、術(shù)后管理

• 鎮(zhèn)痛與抗感染：術(shù)后給予bu托啡諾等鎮(zhèn)痛藥物，并預(yù)防性使用抗生素。

• 生命體征監(jiān)測：觀察小鼠活動、呼吸及心電圖變化，確保術(shù)后恢復(fù)穩(wěn)定。

四、模型評估方法

1. 功能評估：

• 心電圖（ECG） ：檢測ST段抬高、T波倒置等缺血再灌注特征性變化。

• 心臟超聲：評估左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）等血流動力學(xué)指標(biāo)。

2. 組織學(xué)評估：

• TTC染色：量化心肌梗死面積，正常心肌呈紅色，壞死區(qū)域蒼白。

• HE染色：觀察心肌炎癥細(xì)胞浸潤及組織結(jié)構(gòu)破壞。

3. 生化指標(biāo)：

• 檢測血清CK-MB、cTnI等心肌損傷標(biāo)志物，以及TNF-α、IL-6等炎癥因子水平。

五、研究應(yīng)用示例

1. 機制研究：

• TSPYL5蛋白在缺血再灌注后表達(dá)顯著下調(diào)，提示其可能與損傷相關(guān)。

• Rho激酶抑制劑（如法舒地爾）通過抑制白細(xì)胞聚集減少心肌梗死面積。

2. 藥物干預(yù)：

• bu托啡諾預(yù)處理可降低Caspase-3活性及炎癥反應(yīng)，減輕心肌損傷。

• 鹽酸戊乙奎醚通過調(diào)節(jié)MIF/AMPK通路發(fā)揮保護作用。

3. 基因調(diào)控：

• 敲除vaspin基因加重?fù)p傷，而過表達(dá)HINT2基因可改善微循環(huán)及線粒體功能。

六、注意事項

• 手術(shù)技巧：需精細(xì)操作以減少胸腔出血和應(yīng)激反應(yīng)，避免影響實驗結(jié)果。

• 模型穩(wěn)定性：曾有報道稱模型可能出現(xiàn)重復(fù)性問題，可能與麻醉深度、結(jié)扎位置或術(shù)后護理有關(guān)。

• 代謝影響：去卵巢可能改變小鼠代謝狀態(tài)（如糖脂代謝），需在實驗中設(shè)置對照組。