上海染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)

上海染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)

真核生物的基因組DNA以染色質(zhì)的形式存在，研究蛋白質(zhì)與DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑。與傳統(tǒng)的EMSA技術(shù)相比，染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)（CHIP）能真實(shí)完整地反映結(jié)合在DNA序列上的調(diào)控蛋白，是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的佳方法。

上海染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)原理

是在活細(xì)胞狀態(tài)下以甲醛固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，超聲將其隨機(jī)切斷為長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后加入目的蛋白抗體，通過抗體沉淀靶蛋白-DNA復(fù)合物，通過洗脫的方法得到富集的靶蛋白-DNA復(fù)合物，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測（PCR分析），從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

應(yīng)用

1.組蛋白修飾研究

2.轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析

3.藥物開發(fā)研究

4.有絲遺傳性研究

5.DNA損傷與凋亡分析